Separação das Restantes!

Olá,

Hoje fomos separar as moscas que já tinham nascido.

A separação foi feita tendo como objectivo isolar as fêmeas e os machos, para garantir a virgindade das fêmeas que, como já foi referido, têm capacidade de armazenar o esperma após uma fecundação.

Com a certeza que as fêmeas são virgens, poderemos usá-las para os cruzamentos entre as linhas puras, tendo a certeza que o esperma que as fêmeas terão para fecundar os óvos serão da espécie que queremos e não resulte do armazenamento de outros dadores da espécie da fêmea.

Como podem ver na figura, as moscas estão a ser adormecidas (à frente) nas câmaras com éter;
Posteriormente são colocadas em caixas de petri, devidamente identificadas, e levadas a análise à lupa (atrás), onde os machos são distinguidos das fêmeas.
Após a distinção, os machos e as fêmeas são colocados em diferentes tubos devidamente identificados.

Esta semana, começam os cruzamentos, sem falta!

Separação!

Olá a todos!!

Hoje temos novidades!
Como dentro em breve iremos começar os cruzamentos que o Visionarium propôs, tivemos de separar as moscas por sexos, para tal utilizámos uma lupa binocular.

Esperamos não encontrar pupas, caso contrário, é sinal de que a separação não foi feita de maneira correcta e que ocorreram cruzamentos.

Aqui é possível observar:

                                     -» Os tubos com as moscas no seu meio de cultura (à esquerda)

                                     -» A câmara de adormecimento (frasco de vidro à esquerda)     

                                     -» Dois frascos de éter (frascos castanhos)                                 

                                     -» Os tubos com a papa (à direita)

                                     -» O algodão (que serve para rolhar os tubos)

                                     -» Caixas de Petri (canto inferior direito do tabuleiro)

Até à próxima!!

Actividade em curso!

Neste preciso momento encontramo-nos em actividade prático-laboratorial.

Devido a pequenos erros, tivemos que voltar a adormecer as moscas com éter, de modo a deslocá-las para os novos frascos com a nova papa.

Nós e a papa!

Olá a todos!!

Houve um pequeno problema com a nova papa, que elaborámos no dia 9 de Fevereiro. Apresenta humidade em demasia, e tivemos de colocá-la na estufa.

Esperemos que amanhã se encontre mais seca para podermos começar com os
                                           PRIMEIROS CRUZAMENTOS

Obrigado a todos os que nos seguem!!

Novidades

Antes de mais, boa noite a todos,

O novo meio de cultura que fizemos seguindo as indicações do Visionarium, correu bem e foi um sucesso!
Ficou com a consistência desejada e esta semana faremos a troca de todas as moscas para os novos meios de cultura.

Vão-se mantendo informados, visitando o nosso blogue.

Nova cultura de moscas!

Hoje realizámos a nova cultura (papa) para as moscas de acordo com as novas instruções fornecidas pelo Visionarium, como já tinhamos referido ontem no post.

Introdução e procedimento: 

As larvas e moscas adultas alimentam-se essencialmente de leveduras (fonte importante de proteínas) e açúcares (fonte importante de energia).

Existem vários meios de cultura para a manutenção da Drosophila melanogaster. 

Neste projecto usámos um meio bastante frequente, pouco dispendioso, e de fácil preparação:

	1/2 L
Extracto de levedura (g)	10
Farinha de milho (g)	35
Agar-agar (g)	5
Açúcar (g)	37,5
Extracto de malte (g)	22,5
Água (a ferver) (mL)	550
Nipagin (mL)(*)	12,5

^(*)Para evitar ou minimizar a contaminação do meio com fungos e ácaros é usado o Nipagin (antifúngico).

• Pesamos todos os ingredientes excepto o Nipagin num copo grande de plástico;
• Misturámos muito bem todos os ingredientes para evitar a presença de grumos;
• Adicionámos a água a ferver gradualmente;
• Transferimos o meio para frascos de vidro autoclaváveis;
• Quando a temperatura do meio atingiu 45 ºC – 50 ºC, adicionámos Nipagin**
• Transferimos, aproximadamente 5 mL, para os frascos de cultura.

**Nipagin 10%, em etanol 96% p.ex.: 10g Nipagin em 100 mL de etanol.

O meio depois de preparado foi colocado em frascos, previamente esterilizados, com rolhões de algodão, e deixou-se arrefecer. 

Medição dos ingredientes necessários 

Mistura (papa)

Produção de Nippagin 

Aquecimento da cultura (papa)

Preparação do fermento ( fermento de padeiro e água) 

 Continuação da preparação da cultura

 Recolha de materiais necessários para a preparação da cultura

E  assim foi a realização da nova cultura para as moscas. Esperemos que desta vez, não haja qualquer problema, de modo a podermos prosseguir com o projecto.

Sexta daremos mais notícias.

Um obrigada a vocês !!

Bad News!!

Olá,

Hoje recebemos uma má notícia!!

Só hoje nos chegou às mãos o CD do Visionarium, onde são indicados os cruzamentos e a maneira de fazer a papa, entre outras coisas.

E constatamos que a maneira como fizemos a papa até agora (os ingredientes) são um pouco diferentes daqueles que o Visionarium requer.

Amanhã iremos fazer a nova papa, seguindo as indicações do Visionarium.

É indispensável dizer que não comentemos nenhum erro procedimental na realização da papa, apenas o procedimento que utilizámos, proveniente da Fundação Calouste Gulbenkian  não é igual ao do Visionarium, mas como o Visionarium tardou em enviar o seu procedimento tivemos de recorer a outras fontes e contactos que tivemos.

Obrigado a todos por nos seguirem, amanhã teremos mais novidades, bem como fotos e o procedimento da realização da papa seguindo os passos do Visionarium!!

Amanhã teremos novas fotos e novas informações

Olá a todos,

Hoje, como é normal, fomos ver as nossas moscas, e os adultos estão todos bem, o eter não os afectou muito, pelo que não tivemos muitas baixas.

As moscas que ainda se encontram no estado de pupa ainda não eclodiram pelo que ainda não se reproduziram nem provaram a papa que fizemos!!!

Amanhã vamos trocar a Drosophila melanogaster yellow (que está a substituir a stubble, que não nos foi facultada) de frasco, porque já está desde o início naquele frasco e temos de mudá-las para um novo meio de cultura.

Já temos fotos das imagens que vimos na lupa, as nossas Drosophilas vistas à lupa, mas as que temos não estão muito boas, pelo que amanhã vamos tirar mais fotos e logo as publicaremos.

Até amanhã.

As moscas hoje dormiram uma sesta

Olá a todos,

Hoje tivemos de adormecer as moscas para as analisarmos, para que fosse possível analisarmos à lupa as diferenças entre os machos e as fêmeas e, ainda, para separar as moscas adultas dos seus descendentes que se encontram no estado de pupa (último estado do ciclo de vida de Drosophila melanogaster - figura 1)

Fig.1

Como podem ver na figura 1, as moscas encontram-se no estado de pupa durante 5 dias e, ao fim desses 5 dias, eclodem, atingindo o estado de adulto de maturidade sexual 12 horas após a eclosão.

Em relação ao adormecimento tivemos de realizar as seguintes etapas:

1- Preparar a câmara de adormecimento - gaze embebida em éter num frasco tapado

2- Furar um recipiente próprio de plástico (furos não muito largos para que as moscas não escapem)

3- Verter um frasco que contem cada linha pura de Drosophila melanogaster (um de cada vez, para não ocorrerem cruzamentos não esperados)

4- Em cada frasco depois de retirar as moscas, ficam as pupas no meio de cultura em que estavam

5- As moscas retiradas de cada frasco vão para novos frascos, com os meios de cultura já preparados e devidamente identificados

6- Todos os frascos, aqueles que contêm as moscas e aqueles que contêm os descendentes (no estado de pupa) são todos rolhados com algodão hidrofóbico

 

Materiais para adormecimento

 

Montagem da Câmara de Adormecimento

 Câmara de Adormecimento preparada

 

Adormecimento da mutante Ebony

Colocação dos progenitores adormecidos nos novos meios de cultura (preparados  na sexta-feira passada)

Moscas ainda adormecidas, no novo meio de cultura

 Retirar as moscas que morreram da câmara de éter

 Retirar as moscas da câmara de adormecimento

 Moscas mortas

Para além deste procedimento ainda analisámos à lupa as moscas para distinção do sexo e outras características.

 Observação das Drosofilas, utilizando uma lupa binocular

Amanhã teremos de ir ao Laboratório de Biologia, para apurarmos quantas tomaram o sono da eternidade e quantas se encontram vivas (Esperamos que tenham sobrevivido todas!!!!!) 

Até amanhã!